Дегенеративные заболевания сетчатки – основная причина неизлечимой слепоты. Большие надежды возлагаются на клеточную терапию, которая позволит заменить утраченные светочувствительные клетки сетчатки.
Британские ученые из UniversityCollegeLondon показали, что большинство делящихся предшественников светочувствительных клеток, экспрессирующих трансген NrlGFP, после трансплантации интегрируются в поврежденную сетчатку и восстанавливают ее чувствительность к свету. Поскольку клиническое использование генетически модифицированных клеток нежелательно, ученые искали стратегию отбора предшественников фоторецепторных клеток при помощи соединенных с флюорохромом антител к поверхностным антигенам этих клеток.
При помощи анализа постнатальных клеток-предшественников, экспрессирующих NrlGFP, в качестве кандидатов для отбора было выявлено четыре гена, кодирующих поверхностные антигены (Nt5e, Prom1, Podxl, Cd24a).
Чтобы проверить терапевтический потенциал донорских клеток, выделенных по этим поверхностным маркерам, их трансплантировали в глаза мышам дикого типа или линии Crb1(rd8/rd8), или Prph2(rd2/rd2). Отобранные по маркерам CD73/CD24 клетки мигрировали в наружный ядерный слой, приобретали морфологию зрелых фоторецепторов и экспрессировали маркеры наружного сегмента. Эффективность их интеграции в сетчатку была в 18 раз выше, чем у
несортированных клеток и в 2,3 раза выше, чем
у клеток, отобранных по единственному генетическому маркеру, экспрессии NrlGFP.
Результаты этих исследований доказывают, что пригодные для клеточной терапии фоторецепторные клетки могут быть эффективно отобраны из гетерогенной смеси клеток-предшественников по определенным поверхностным маркерам. При этом сортировка не уменьшает жизнеспособности клеток и эффективности клеточной трансплантации.
Использование лучше очищенных от примесей других донорских клеток светочувствительных клеток-предшественников значительно увеличивает интеграцию в сетчатку трансплантированных клеток, что позволяет достичь лучших результатов клеточной терапии для восстановления зрения.
